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流式檢測細胞周期

流式檢測細胞周期

貨    號: HS-CR008

產(chǎn)品規(guī)格: /樣

價    格:--

周    期: 2周

產(chǎn)品介紹

一、服務簡介

       細胞周期(Cell Cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經(jīng)歷的全過程,細胞的遺傳物質復制并均等地分配給兩個子細胞。細胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細胞在分裂結束后暫時離開細胞周期,停止細胞分裂,執(zhí)行一定生物學功能(G0期)。  流式細胞儀的工作原理是將待測細胞放入樣品管中,在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細胞柱。通過對流動液體中排列成單列的細胞進行逐個檢測,得到該細胞的光散射和熒光指標,分析出其體積、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、抗原等物理及化學特征。

      細胞內的DNA含量隨細胞周期進程發(fā)生周期性變化,如G0/G1期的DNA含量為2C,而G2期的DNA含量是4C。利用PI標記的方法,通過流式細胞儀對細胞內DNA的相對含量進行測定,可分析細胞周期各時相的百分比。


二、技術流程

1、取對數(shù)生長期細胞,倒去培養(yǎng)液,胰酶適度消化細胞,用培養(yǎng)液吹打,800 rpm,離心 15 min去上清。

2、PBS洗2次,加0.5 mL PBS吹勻,務必吹散。

3、用5 mL注射器將細胞吸起,用力打入5 mL 70%(預冷)乙醇中,封口膜封口。4℃固定過夜(可長至2周)。

4、800 rpm 15 min收集固定細胞,PBS洗2次。

5、用0.4 mL PBS重懸細胞并轉至Tube中輕輕吹打(防止細胞破碎)。

6、加RNase-A約3 μL至終濃度約為50 μg/mL ,37℃水浴消化30 min;

七、加PI約50 μL至終濃度約為65 μg/mL ,在冰浴中避光染色30 min。

八、用300目(孔徑40~50微米)尼龍網(wǎng)過濾,上機檢測。

九、樣品分析測定及打印。


三、服務說明

1、 客戶提供:狀態(tài)良好的受試細胞;  

2、實驗周期:1-2周;

3、明確檢測時間

4、提供流式原文件


四、成果展示



五、詢價及訂購

感謝您選擇我公司的流式檢測細胞周服務。如有相關問題請聯(lián)系我們的工作人員。